羧基-瓊脂糖凝膠 4B C7H4ClNO 現(xiàn)貨
羧基-瓊脂糖凝膠4B是用由環(huán)氧樹(shù)脂耦合方法將6-氨基已酸共價(jià)鍵偶聯(lián)到瓊脂糖4B上。羧基-瓊脂糖凝膠4B含有一個(gè)10個(gè)碳原子連接臂自由羧基,耦合氨基基團(tuán)的配體。長(zhǎng)長(zhǎng)的間隔臂使它特別適合固定的小分子。產(chǎn)品名稱(chēng):羧基-瓊脂糖凝膠4B (ECH Sepharose 4B)基質(zhì):4%瓊脂糖凝膠耦合基團(tuán):氨基顆粒大小:90μm大流速:75cm/h操作溫度:室溫
羧基-瓊脂糖凝膠4B是用由環(huán)氧樹(shù)脂耦合方法將6-氨基已酸共價(jià)鍵偶聯(lián)到瓊脂糖4B上。羧基-瓊脂糖凝膠4B含有一個(gè)10個(gè)碳原子連接臂自由羧基,耦合氨基基團(tuán)的配體。長(zhǎng)長(zhǎng)的間隔臂使它特別適合固定的小分子。
產(chǎn)品名稱(chēng):羧基-瓊脂糖凝膠4B (ECH Sepharose 4B)
基質(zhì):4%瓊脂糖凝膠
耦合基團(tuán):氨基
顆粒大?。?/strong>90μm
大流速:75cm/h
操作溫度:室溫
保存條件:貯存于4°C-8°C(保存溶液為20%乙醇)
使用方法
1.乙醇浸泡:在室溫下,將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時(shí),并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,用無(wú)鹽水洗去殘存的乙醇濾干;
2.無(wú)鹽水浸泡:室溫下,在無(wú)鹽水中充分溶脹24小時(shí),間隙攪拌,以保證凝膠的*溶脹,然后;
3.鹽酸浸泡:在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時(shí),間隙攪拌,濾干,水洗只中性;
4.將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi),注意保持濕態(tài)裝柱,并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層;
5.上樣前平衡層析柱至少3-5個(gè)柱體積直到記錄儀基線(xiàn)變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);
6.凝膠過(guò)濾的上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關(guān),柱高控制在40-50cm以下,過(guò)高的凝膠層會(huì)引起較大的反壓,應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有定柱高和流速控制,脫鹽時(shí)高徑比為5:1即可;
7.洗脫方法:可以用無(wú)鹽水,也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化;
8.在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個(gè)柱體積,再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。